S-anti-TPO (tyreoidea peroxidas) antikroppar
Rev:2007-10-30
BAKGRUND
Tyreiodeaperoxidas (TPO) är ett membranprotein lokaliserat till sköldkörtelfolliklarnas insida. Det katalyserar inbindningen av jod till tyreoglobulin och bildningen av tyroxin (T4) och trijodtyronin (T3). Vid autoimmuna tyreoideasjukdomar störs ordningen och man kan påvisa TPO även på utsidan av folliklarna dvs den del som har kontakt med kroppens immunkompetenta celler. Autoantikroppar mot TPO uppträder då i hög frekvens i serum vid autoimmunt betingade tyreoideasjukdomar såsom Hashimoto`s tyreoidit, och är mestadels av IgG klass. Analys av anti-TPO antikroppar ersätter den tidigare allmänt använda bestämningen av mikrosomalt tyreoideaantigen som numera anses vara mindre specifik och känslig.
ANALYSPRINCIP
Immunologisk kvantitativ mätning med ”ECLIA”, (electrochemiluminescence immunoassay) enligt kompetitiv princip på instrumentet Cobas E.
Prov inkuberas med anti-TPO antikroppar märkta med ett ruteniumkomplex. Efter tillsats av biotinylerat TPO och streptavidintäckta mikropartiklar, konkurrerar anti-TPO antikropparna i provet med de ruteniummärkta anti-TPO antikropparna om det biotinylerade TPO-antigenet. Hela komplexet binder till den fasta fasen genom interaktioner mellan biotin och streptavidin. Reaktionsblandningen aspireras in i mätcellen där de magnetiska mikropartiklarna fastnar på elektrodytan. Obundna substanser sköljs bort med buffert. En spänning läggs på elektroden, varvid chemiluminescent emission uppstår och mäts i en fotomultiplikator. Emissionen är omvänt proportionell mot koncentrationen anti-TPO. Metoden är spårbar till NIBSC 66/387 standard.
PROVTAGNING OCH PROVHANTERING
Serum från SST-gelrör eller rör utan tillsats. Minsta mängd 20 µL plus dödvolym (100 µL i Hitachi-kopp; 300 µL i 5 mL rör). Hållbart 3 dagar i kylskåp eller 1 månad vid -20°C (Ref.1). Centrifugering i 10 minuter, 20°C vid 2000 g.
METODVALIDITET
|
Detektionsgräns: |
5 kIU/L |
|
Mätområde: |
5 - 600 kIU/L |
|
AckrediteringsCV : |
10 % vid 35 kIU/L
7 % vid 100 kIU/L |
Interferenser: Analysen påverkas inte av:
hemolys: Hb < 15 g/L
ikterus: bilirubin < 1129 µmol/L
lipemi: intralipid (Triglycerider) < 23.9 mmol/L
(Roche, insert, ref.1).
REFERENSOMRÅDE
| Vuxna |
< 35 kIU/L |
|
| Barn (2-19 år) |
< 20 kIU/L |
(Ref.2) |
BEDÖMNING
Förekomst av autoantikroppar mot TPO är karakteristiskt vid autoimmuna tyreoidea-sjukdomar. Förhöjda titrar ses hos > 90% av patienter med Hashimoto`s tyreoidit och hos > 70% med Graves` sjukdom.
Ökade titrar av TPO antikroppar ses även vid så kallad subklinisk hypotyreos, tyreoideacancer, multinodös struma, toxiskt adenom samt hos kvinnor med postpartum tyreoidit.
Bland normalbefolkningen uppvisar ca 10% förhöjda titrar av TPO-antikroppar utan att manifest tyreoideasjukdom föreligger. Studier har dock visat att sådana personer har en ökad risk för att utveckla hypotyreos särskilt då TSH samtidigt ligger inom över delen av referensintervallet.
REFERENSER
1. Roche, insert, anti-TPO, 2005-08, V10.
2. Referens intervals for children and adults. Elecsys Thyroid Tests. Roche Diagnostics GmbH, p.51, December 2004.